Analiza ELISA - test de sange legate de imunosorbție, care este o transcriere, diagnostic și modul în care este

immunosorbent assay (ELISA) - reprezintă o modalitate modernă de recunoaștere a numărului mare de agenți patogeni se bazează pe abilitatea corpului uman de a produce așa-numiții anticorpi ca răspuns la detectarea substanțelor străine - antigeni.

In prezent, test de sânge ELISA utilizat:

• pentru a diagnostica o multitudine de boli cu transmitere sexuală;
• pentru a identifica predispoziția la anumite boli cauzate de moștenire;
• pentru a identifica o anumită etapă a bolii;
• pentru a monitoriza eficacitatea tratamentului.

De exemplu, pe scară largă, această metodă a primit diagnosticul de următoarele boli:

În ceea ce privește practica medicală generală, în acest caz, testul de sânge enzimei imunotestare vă permite să:

• identifica patologii endocrine, cum ar fi diabetul zaharat;
• evalua probabilitatea de a avea un accident vascular cerebral sau atac de cord;
• pentru a înțelege cât de bine sistemele organismului;
• relevă prezența reacțiilor alergice;
• evalua activitatea sistemului imunitar;
• evaluează starea funcțiilor reproductive ale corpului.

Material pentru studiul în acest caz, poate fi sânge sau lichid venos în trunchiul măduvei spinării, secreția umoarea vitroasă, lichidul amniotic.

reacțiile imune și enzimatice

După cum rezultă în mod clar din numele, analiza ELISA de sange include mai multe componente, și anume - reacțiile imune și enzimatice.
Răspunsul imun permite celulei de a lega celulele și agenți patogeni și de enzime permite vizualizarea și evalua rezultatul din reacția anterioară.

Luați în considerare fiecare reacție mai în detaliu.

Ce este un răspuns imun?

Chemat răspunsuri specifice imune care permit antigenului de a se lega la anticorpi si de a crea un complex imun. Ce înseamnă acest lucru? În primul rând, trebuie să se înțeleagă că orice suprafață celulară conține molecule care conțin datele celulei, numite antigeni, și sunt împărțite în:

antigenele individuale, în ciuda unor similitudini, există și multe diferențe. Acestea sunt disponibile într-un anumit organism și nu sunt niciodată la fel în altele. antigene specifice pot fi găsite în organisme din anumite specii de ființe vii. De exemplu, maimuțe, cai și câini au propria lor, indiferent de ce nu le place de antigen. De aceea, acest tip de antigene sunt folosite de sistemul imunitar sa recunoasca propriile lor si a altor celule, care, strict vorbind, este baza Enzyme Linked test de sange imunosorbent.

Cum de a recunoaște antigenele? Aici totul este destul de clar. În termeni simpli, celula, care este imun, prinde cușcă care a provocat-o „suspiciune“, și o compară cu antigenul în memoria descrierii existente. În cazul în care creșterea de antigen indoieste celule îi corespunde, celula imunitar „da drumul“ și merge mai departe. În cazul în care descrierea este diferit, răspunsul organismului la amenințarea unuia - distrugere. Mai mult decât atât, recunoașterea „inamicului“, în acest caz, este egal cu aproape 100%.

Ce este un anticorp?

anticorp Inerent având o mare importanță atunci când se utilizează metoda ELISA este o moleculă specială existentă pe suprafața celulelor imune, și permițând acestuia să contacteze cu antigene de microorganisme discutabile. Este un anticorp servește ca date de ghidare pentru evaluarea amenințării, și că primește semnalul a ceea ce este cușcă îndoielnic - ea sau străină. Dacă celula capturat este anticorpul „lor“ antigen produce și eliberează lui „amanta“.

De ce este nevoie de un complex imun?

Așa cum am menționat puțin mai devreme, în recunoașterea celulelor străine anticorpul nu lasa antigenul de celule străine. Dimpotrivă, prin trimiterea anumite semnale, solicită ajutor „consolidare“. În acest caz, vorbim despre faptul că toți ceilalți anticorpi, situate într-o altă parte a celulei, care este imun, începe să se deplaseze în zona, semnalează un pericol, și se leagă cu un antigen capturat, fixându-l și este înconjurat pe toate laturile. După antigenul va fi complet înconjurat de, începe distrugerea unui microorganism străin.

Anticorpii care dezvăluie diagnostic ELISA, sunt structuri proteice - imunoglobuline sunt împărțite în mai multe tipuri:

Cu toate acestea, pentru diagnostic luate numai un singur tip de anticorp, care este cel mai specific pentru microorganism necunoscut. De obicei, astfel de anticorpi sunt specii IgG și IgM.

Care este reacția enzimatică?

Se numește reacție enzimatică care permite un material la altul turn. Un material care acționează în sânge prin studiul ELISA este numit „substrat“, iar materialul obținut prin enzima este numit „produsul de reacție“. Mai mult, caracteristicile acestui proces sunt, care afectează o anumită enzimă poate în mod exclusiv pe un anumit substrat. Astfel de proprietăți enzimatice sunt determinate prin „proprii“ substratul se numește „afinitate“. Pe baza celor de mai sus, este extrem de clar faptul că fiecare enzimă legată exclusiv unul care este specific numai pentru răspunsul său.

Trebuie remarcat faptul că metoda de diagnostic implică utilizarea IFA nu mai mult de zece tipuri de reacții enzimatice, care sunt formate datorită kolorirovannye substanței, permite utilizarea pentru determinarea concentrației metodei reacției chimice agent - colorimetrie.

Ce este colorimetrie?

Colorimetrie - o metodă pentru măsurarea concentrației substanței în funcție de care este densitatea culorii soluției, ceea ce implică utilizarea special concepute pentru acest dispozitiv - colorimetru.

Mai mult decât atât, în acest caz, există două variante de densitate de culoare în funcție de concentrația soluției:

• direct proporțională;
• invers proporțională.

În primul caz culoarea densitatea soluției este crescută prin creșterea concentrației sale în cea de a doua soluție aceeași densitate de colorare scade odată cu creșterea concentrației. Punct de vedere tehnic, acest lucru se face după cum urmează. mai multe soluții luate, substanțe care au o anumită concentrație, măsurătorile sunt realizate din densitatea lor, iar apoi se construiește un grafic al densității culorii concentrația soluției. Densitatea culorii soluției de testare a fost apoi măsurat, iar programul este construit într-o valoare precisă a concentrației sale, care este în concordanță cu densitatea culorii măsurată a soluției.

Fiind folosit pentru măsurarea după o singură Colorimetrele de calibrare, capabile de a construi o curbă de calibrare, rămân în memoria lor, și le permite să funcționeze în modul automat. Trebuie remarcat faptul că în sânge ELISA, utilizate în general enzime, cum ar fi avidina, peroxidaza și fosfataza alcalină.

Metode de ELISA

În funcție de metoda de realizare a studiului EIM este împărțit în înainte și înapoi. Luați în considerare fiecare dintre metodele de mai detaliat.

Ce este „testul immunosorbent direct legat„?

imunoenzimatice directă implică utilizarea de anticorpi la un antigen definit conectat un marcaj special, care este un substrat de reacție având o natură enzimatică. Prin urmare, ELISA direct - o analiză a materialului biologic pacient sângera plasate în godeuri, urmată de adăugarea de anticorpi la un antigen al unei boli.

Astfel, detectarea anticorpilor sifilis sunt adăugați în godeuri împotriva antigenelor sifiliticilor obținute în fabricarea și achiziționate de laborator. Amestecul rezultat a fost lăsat timpul necesar pentru a captura anticorpul „său“ antigen. Mai mult decât atât, așa cum sa menționat anterior, anticorpii declanșează reacția și se leagă cu o anumită etichetă.

Deoarece anticorpul se adaugă la multe, nu toate dintre ele va fi capabil de a capta antigenul în cazul localizarea în eșantion. Pentru a scapa de excesul de anticorp, lichidul turnat din godeuri. Anticorpii legați, de asemenea, la antigenele sunt pe suprafață. Apoi trece la a doua parte a analizei privind ELISA - reacția enzimatică. Soluția de enzimă se adaugă în godeuri și acolo este lăsat timp de o jumătate de oră sau o oră. În mod natural, eticheta este similară cu enzima adăugată, legarea anticorpului. La sfârșitul reacției în sondă este o substanță care au dobândit o nuanță corespunzătoare.

substanță colorată investigate colorimetru. Mai mult decât atât, pentru că eticheta este disponibilă în bine, deja în contact cu anticorpul, concentrația substanței colorante formate vor corespunde concentrației de anticorpi, similar ca mărime la numărul de antigeni. Astfel, analiza ne permite să înțelegem cât de mult de microorganisme detectate sau hormoni conținute în eșantion retras.

Ce este un test imunologic enzimatic indirect?

test de sânge indirect pentru EIA se realizează în 2 faze. În prima etapă, se utilizează anticorpi nemarcați adăugate pentru a determina antigenele dorite, iar al doilea - anticorp marcat la anticorpul primar nemarcată. În acest fel, este posibil să se efectueze un control dublu al reacției:

• anticorp comunica cu antigenul;
• acești anticorpi se leagă la anticorpii legați la antigenul respectiv.

Analiza se efectuează după cum urmează. materialul biologic Pacientul este luat este introdus în godeuri și lăsate până la momentul în antigeni nu sunt respectate suprafața lor. Apoi, la acesta se adaugă anticorpi nemarcați și lăsat timpul necesar pentru ca acestea să contacteze antigenele disponibile prin plasarea complexului imun dorit. După procesul de legare este terminată, excesul de anticorp este îndepărtat prin turnarea lichidului din godeuri.

La finalul acestui proces, sunt luate de anticorpi (marcat) următoarele, sunt adăugate în godeuri și lăsate pentru timpul necesar pentru formarea unui complex de 2 anticorpi si antigen. Soluția este apoi turnată ca (pentru a îndepărta anticorpii nedorite).

În etapa următoare o analiză ELISA indirectă a enzimei introdus sange care convertește „etichete“ într-o substanță cu o culoare. Dezvoltarea culorii în acest caz durează cinci minute până la o jumătate de oră. După dezvoltarea culorii produc colorimetrie și concentrația soluției cu o culoare. Deoarece această valoare, în acest caz corespunde concentrației de anticorpi cu etichete, care este egală cu concentrația de antigen în finalul studiului se poate obține o idee a conținutului cantitativ al agentului cauzal.

Cum decriptate sânge teste ELISA?

În lumea de astăzi de analiză medicina transcript prin ELISA de sânge nu poate diagnostica numai boala, dar, de asemenea, pentru a înțelege în ce stare se află pe tipul de anticorp prezente în acest moment, în organism. Astfel, doar o singură analiză pentru a determina faza acută sau cronică a bolii. De exemplu, prezența anticorpilor IgM indică faptul că boala este într-un stadiu acut al fluxului.

Acest tip de anticorpi se produce imediat după infecție și sunt doar un om bolnav al organismului. Apoi, anticorpii IgM dispar. Astfel, prezența acestor anticorpi este necesară atribui imediat un tratament.

În prezența anticorpilor Ig G, apar în organism după ce persoana a recuperat, și a avut loc tot timpul, tratamentul nu este necesară datorită faptului că ele vorbesc doar despre acest proces, a dobândit o formă cronică. Anticorpii de acest tip sunt un tip de marker care un pacient a suferit o data aceasta boala si a fost purtătorul unei vieți.

Dacă detectat în materialul biologic și anticorpi IgM și Ig G, decodare testul imunosorbent va spune ca pacientul a fost o exacerbare a unei boli cronice, care necesita un tratament adecvat. Există un alt tip de anticorp - Ig A, care spune despre stadiul acut al bolii. Acești anticorpi persistă în organism timp de 4-5 săptămâni și dispar după recuperare. Prezența unor astfel de anticorpi indică faptul că pacientul este un purtător potențial al unei boli.