Determinarea punctului izoelectric al proteinelor - studopediya

Separarea proteinelor albumine și globuline ou belka.Vysalivanie

Sărare afară se referă la izolarea procesului de proteine ​​din soluții apoase de săruri neutre, soluții concentrate de metale alcaline și alcalino-pământoase. Când adăugați concentrații mari de sare la deshidratarea soluție de proteină se produce particule proteice și îndepărtarea de încărcare, proteinele precipită. Gradul de pierdere a proteinelor din precipitat depinde de tăria ionică a precipitant, dimensiunea particulelor a moleculei de proteină, valoarea sarcinii sale, hidrofilicitatea.

Alte proteine ​​precipită la diferite concentrații de sare. Prin urmare, în precipitarea obținută prin creșterea treptată a concentrației de sare, proteinele individuale sunt găsite în fracțiuni diferite. Sărare în proteine ​​este reversibilă și după îndepărtarea proteinei sărurilor își recapătă proprietățile sale naturale. Prin urmare, sărare utilizate în practica clinică pentru separarea proteinelor serice de sânge, precum și pentru izolarea, purificarea diferitelor proteine.

Materialul de testat. albus de ou.

Echipament: eprubete, pipete.

MUNCA PROGRESS. Țeava de turnare 20 de picături de proteine ​​de ou nediluat, un volum egal de soluție saturată de sulfat de amoniu, se agită conținutul. Se obține o soluție jumătate saturată de sulfat de amoniu, un globulină ou precipitat. După 5 min, precipitatul a fost îndepărtat prin filtrare. Filtratul este o altă proteină - ovalbumină. Pentru sărare albumina la filtrat se adaugă pulbere de sulfat de amoniu a fost măcinat până la saturare completă, adică atât de mult, până când nu dizolvare suplimentară de sare. albumină precipitat a fost îndepărtat prin filtrare și filtratul a face o reacție biuret. O reacție negativă indică absența proteinei.

Clearance-ul. Rezultatele sunt introduse în tabel.

Desalinizării precipitarea proteinelor

Punctul izoelectric este o valoare specifică a pH-ului la care proteina este sub forma de molecule neutre (în starea lor izoelectric) care transportă cantități egale de sarcini pozitive și negative. Cu alte concentrații de ioni de hidrogen din soluție sunt de preferință atât proteina pozitiv și negativ ioni. Soluțiile de proteine ​​la punctul izoelectric al cel puțin stabil și ușor de precipitat.

Pentru cele mai multe proteine, punctul izoelectric este aproape de condiții neutre, dar nu coincid pe deplin cu ea, pentru multe proteine, aceasta este deplasată spre partea acidă și unele proteine ​​au un punct izoelectric la o reacție ușor alcalin a mediului. Determinarea punctului izoelectric se poate reduce la determinarea pH-ului la care există cea mai mare pierdere rapidă și completă a proteinelor din precipitat.