Fenomenul vieții
Nu contează cât de greu să recunosc, dar noi toți vin în această lume pentru un singur scop - pentru a trece ADN-ul lor generațiilor viitoare. Un alt punct în existența organismelor vii de pe planetă acolo. E neplăcut, desigur, conștienți de faptul că corpul fiecăruia dintre noi este o membrană vie, și este închisă și ADN-ul. Dar diferența în sensul vieții între om și bacterii nu meschin.
Omenirea pentru multe mii de ani rătăcind în întuneric și încercând să afle sensul vieții. În acest scop, culturi diferite, religii, a fost creat muzica, poezie, pictura. Dar toate acestea nu are nimic de-a face cu gene si proteine. Asta este, se pare că fenomenul vieții nu are nimic de-a face cu mintea și sufletul.
Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că acesta este corpul uman este unul dintre cele mai bune pachete în care moleculele 2-lanț reproduce cel mai confortabil. Aceeași structură 2-lanț este considerat a fi cea mai optimă pentru multiplicare rapidă.
Și într-adevăr, dacă am razvedom 2 catene de ADN, și apoi sintetiza catenele complementare pe fiecare dintre ele, rezultatul este o moleculă de 2 filiale, care vor fi absolut identice cu molecula părinte. În continuare, putem repeta aceeași acțiune cu 2 molecule de filiale. În acest caz, am primit deja 4 molecula nepotului. Și așa mai departe la infinit. Acest proces conduce la o creștere exponențială a numărului de indivizi, numita reacție în lanț.
ADN-ul de reacție în lanț
La început o reacție în lanț, printre cele mai importante clase de reacții chimice. Acest proces a fost descoperit și justificat teoretic, în 30-e ale secolului XX. Descoperirea a fost extrem de important pentru știință. Acest lucru este indicat de cel puțin faptul că descoperitorul lanț de reacții chimice N. N. Semonovu în 1956 a primit Premiul Nobel pentru Chimie.
Datorită o reacție în lanț, oamenii au fost în măsură să explice fenomenul de explozie termică. Sa dovedit a fi fundația pe care ulterior proiectat bomba atomică și reactoare nucleare.
Și aceeași moleculă de ADN. reacție în lanț este exact la fel ca într-un reactor nuclear, adică, într-un mod controlat. Cu alte cuvinte, pentru a vedea analogia completă. Și dacă astfel se observă, reacția în lanț a ADN-ului poate fi realizată in vitro. Pentru a face acest lucru, trebuie doar să se topească molecula, care este de a împărți catene complementare prin încălzire.
Sinteza primeri de ADN la 80-lea ani ai secolului XX, a devenit un lucru obișnuit. Primer în sine - este o bucată scurtă de un singur ADN sau ARN. Aceasta servește ca o sămânță în timpul transcriptases inverse și polimerazele ADN. Revers transcriptaza este o enzimă lider sinteza ADN-ului pe un șablon de ARN. Acest proces se numește transcriere inversă. O enzimă ADN polimerază, de asemenea. Aceasta conduce sinteza ADN prin matrița de ADN.
Care este esența PCR - reacția în lanț a polimerazei. utilizate pentru reproducerea moleculei de ADN într-un tub de testare? Inițial selectat ADN țintă pentru reproducere. Este necesar să se cunoască secvențele terminale ale obiectivului selectat. După aceea, primer 2 sintetizat.
Un fir inferior complementar al moleculei la capătul din stânga al țintei. Cel de al doilea lanț de top este complementar la capătul din dreapta al țintă. Proba se încălzește la ținta de topire. Astfel, catene complementare sunt separate. Următorul pas este să se răcească proba. Acest proces este realizat pentru a obține substratul 2, care va participa la reacția de extensie a primerului.
Pentru substratul a fost adaugat la ADN polimerazei. Aceasta duce la o lungire a 2 primeri față de celălalt. Deci, există două molecule fiice. Acestea sunt doar parțial compuse din 2 lanțuri, și orice altceva - un lanț lung de 1-cozi. cicluri ulterioare de încălzire - răcire - adăugarea polimerazei conduce la sinteza de noi molecule ale căror situs țintă 2-legat.
Dar ADN polimeraza trebuie adăugate la fiecare ciclu. Dar Taq DNA Polymerase permite PCR in modul automat. Această polimerază izolată din bacteria termofilă care trăiesc numai în izvoarele termale din Kamchatka. Rezistă temperatura de încălzire egală cu 94 de grade Celsius.
In prezent, PCR a fost realizată folosind termotsiklora. In vitro, ADN-ul țintă sunt amestecate, patru dNTP (precursor de monomer pentru sinteza ADN-ului prin ADN polimeraza) și Taq-polimerază. Tubul a fost apoi plasat în termotsiklor.
Ultima programată după cum urmează: în primul rând, există o încălzire la 94 de grade Celsius, apoi țineți timp de 1 minut și scăderea temperaturii la 60 de grade Celsius. Din nou, incubare timp de 1 minut. Astfel, primerii se leagă la porțiuni complementare ale țintei. Următorul pas constă în încălzirea la 72 grade Celsius și care dețin un minut, timp în care reacția de extensie a primerului. În acest ciclu se termină și un nou ciclu începe termotsiklor pentru aceeași schemă. Și astfel încât să poată continua la nesfârșit.
Trebuie remarcat faptul că reacția de polimerizare în lanț funcționează la fel de mare. Această metodă sa dovedit a fi pur și simplu indispensabil într-o varietate de aplicații biotehnologice. În cazul în care fenomenul de viață este o reacție în lanț a ADN-ului, atunci nu este un secret, în sensul de a nu mai. De asemenea, trebuie remarcat faptul că, în timpul nostru crește de viață artificială. Ea înflorește în mii de mașini PCR, instalate în laboratoare din întreaga lume.